Stagiaire en Master 2

Le virus de l’hépatite E (HEV) est responsable d’hépatites aigües. En Europe, la majorité des cas sporadiques d’hépatite E résulte d’infections zoonotiques par le génotype 3 qui sont principalement liées à la consommation de denrées à base de foie de porc cru provenant d’animaux infectés. Des modèles cellulaires ont été décrits mais le HEV se réplique difficilement in vitro et un effet cytopathogène (ECP) n’a pas toujours pu être mis en évidence.
L’objectif de cette étude est de développer une méthode de détection des particules infectieuses du HEV par impédance cellulaire.
Le système haut-débit d’analyse cellulaire en temps réel xCELLigence sera utilisé pour cribler et sélectionner le modèle cellulaire permettant de mettre en évidence un ECP du HEV par impédancemétrie. Pour cela, différentes lignées humaines d’origine hépatique (HepaRG, HepG2 et Hu7), intestinale (Caco-2 et T84) et pulmonaire (A549) et de nombreux paramètres d’infection seront évalués.
La sensibilité de la méthode sélectionnée sera déterminée ce qui permettra d’évaluer son utilisation comme méthode de détection quantitative du HEV. La cinétique de réplication sera également réalisée en quantifiant les génomes de HEV dans le surnageant de culture par RT-qPCR et la visualisation d’un ECP sera recherchée en microscopie optique.
Ces travaux permettront de développer une méthode de détection par impédancemétrie des particules infectieuses du HEV pour mieux apprécier le risque viral en virologie alimentaire.